一．實驗簡介

物體認知實驗方法是 1988 年由 Ennaceur 提出，它是基于嚙齒類動物天生具有的新奇偏愛性，用于檢測動物的學習記憶能力，其與傳統的檢測方法相比，不需給予正向( 獎賞) 或反向( 懲罰) 的刺激，也不需冗長的訓練，動物分別根據“新舊物體”特征、位置、出現的順序和所處的背景對“新舊物體”進行辨別，能夠檢測從簡單的物體識別記憶到復雜的空間、時序和情景記憶，對動物學習記憶行為實現精細化區分，實驗簡單易操作。在學習記憶發生發展機制、認知障礙防護藥物和保健品研發等方面具有重要應用價值。

研究物體認知實驗方法有四種：新物體識別實驗、物體位置識別實驗、時序記憶實驗和情景記憶實驗。這四種實驗的實驗步驟和評價指標為學習記憶研究提供一種基于動物自發行為，多模式、精細敏感的行為實驗方法。

二．實驗方法

1.新物體識別實驗：

適應期：實驗中將動物放入沒有任何物體的實驗箱中，每只每天 10 min，每天 1 次，連續 3 d。

熟悉期：第 4天進行熟悉期實驗，開始時箱中不放入任何物體，將動物放入再次適應 2 min，動物取出后，放入兩個*相同的物體，分別記錄每只動物 5 min 內對左側物體的探索時間( exploration time for left object，Tl) 和對右側物體的探索時間( exploration time for

right object，Tr) 。

測試期：熟悉期后將動物放回飼養籠中，10 min 后開始測試期實驗。測試期時放入兩個不同的物體，其中一個物體與熟悉期的物體*相同，另外一個是新奇物體（與熟悉期物體匹配），動物放入后計時 5min，分別記錄動物在不同時間段對熟悉物體的探索時( exploration time for familiar object，Tf) 和對新奇物體的探索時間( exploration time for novel object，Tn)。探索活動定義為: 小鼠的鼻子近距離指向物體或者直接嗅、舔物體。當其他部位接觸物體而鼻子沒有指向物體或站在物體上時非對物體的探索活動。

2.物體位置識別實驗：

適應期與熟悉期實驗過程同新物體識別實驗，而測試期與新物體識別實驗不同，只是將熟悉期中兩個相同物體中的一個移到新的位置，動物放入后計時 5 min，分別記錄動物在不同時間段對兩不同物體的探索時間。

3.時序記憶實驗：

時序記憶實驗程序和上述兩種方法有所不同，實驗流程見圖 1，包括 2 個熟悉期，即熟悉期1和熟悉期 2，其他過程基本相同。適應期同新物體識別。 第 4 天進行熟悉期實驗，開始時箱中無任何物體，將動物放入再次適應 2 min，動物取出后放入兩相同的物體，進行熟悉期 1 實驗，分別記錄 5 min 內對兩個*相同物體的探索時間; 將動物取出后放

入飼養籠中，10 min 后進行熟悉期 2 實驗，在同一個實驗箱中放入另外兩個*相同的物體（與熟悉期1 中物體匹配），分別記錄 5 min 內對兩個*相同物體的探索時間。熟悉期 2 后將動物放回飼養籠中，10 min 后開始測試期實驗。測試期時放入兩個不同的物體，分別是熟悉期 1 和熟悉期 2 中各一個物體，動物放入后計時 5 min，分別記錄在不同時間段對兩不同物體的探索時間 

4.情景記憶實驗：

情景記憶實驗程序與時序記憶實驗類似，也包括2 個熟悉期，但在不同背景的實驗箱中進行，實驗流程見圖 2。適應期實驗將動物放入具有種背景的實驗箱中，適應完成 10 min 后，再放入第二種背景的實驗箱中，每種實驗箱適應過程與新物體識別中適應期實驗相同。第 4 天開始熟悉期實驗，在具有種背景的實驗箱中放入兩相同的物體，進行熟悉期 1 實驗，分別記錄 5 min 內對兩個*相同物體的探索時間; 將動物放回飼養籠中，10 min 后進行熟悉期 2 實驗，在具有第二種背景的實驗箱中放入另外兩個*相同的物體( 與熟悉期 1 中的物體匹配) ，分別記錄 5 min 內對兩相同物體的探索時間。熟悉期 2 后將動物取出放入飼養籠中，10 min 后進行測試期實驗，計時 5 min，分別記錄在不同時間段

對兩不同物體的探索時間。

不同時間間隔時的物體辨別記憶能力考察將動物隨機分為 5 組，熟悉期與測試期間隔分別設置為 10 min，30 min，60 min，90 min，120 min。

實驗步驟與新物體識別實驗相同，僅每組動物檢測時熟悉期與測試期間隔不同。記錄每組動物在 5min 測試期中不同時間段對兩不同物體的探索時間。