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動物腦損傷模型如何制作?腦損傷模型如何準確評估?

更新時間:2020-06-28      瀏覽次數:2570

VisuGait小動物步態分析系統是一種計算機輔助的、自動、定量分析步態系統。能快速的、客觀的定量分析大量動靜態步態參數,尤其是對動態參數的分析是優于其他分析方法。目前該系統已經用于脊髓損傷、神經痛、外周神經損傷、關節炎、帕金森病、缺血性腦卒中、腦損傷等疾病及神經功能、神經再生領域的研究。其中創傷性顱腦損傷(TBI)是死亡率和致殘率z高的疾病之一,TBI后生存患者常殘留運動、認知等神經功能障礙干細胞因其具有自我更新及多向分化能力,在治療腦損傷中具有可行性和有效性。
首先利用上海欣軟電動顱腦脊髓損傷撞擊儀制作創傷性顱腦損傷(TBI)模型,然后采用VisuGait小動物步態分析系統進行大鼠的步態指標測定。


步態測試過程中,每只大鼠接受至少3次評估,每次必須連續的走完設定好的長度范圍玻璃平板,整個實驗過程在暗室環境中完成。VisuGait小動物步態分析系統在識別并標記出每一個腳印后,將自動產生一系列步態參數,包括:每個爪子各自的相對空間關系、爪子之間的相對空間關系、四肢間的協調性、時間參數等。VisuGait小動物步態分析系統評分通過對各種參數的采集,則可清楚、客觀的反映出大鼠四肢爪子每一只的具體情況,尤其對反應大鼠運動的協調性具有明顯優勢。我們從步態分析的各個參數來看,腦損傷后大鼠的運動功能明顯出現功能障礙,干細胞移植治療后則運動功能出現明顯的好轉。

首先,從時間、空間參數上看,TBI后的大鼠相對于正常組,其每一只爪子的壓力、長度、寬度、面積、步幅都發生了減少的變化(這可能與感覺運動皮層受損有關),而四肢之間具有一致性,并沒有出現某一只爪子相對于對側爪子的大幅度變化情況。
通過VisuGait小動物步態分析系統所檢測到四肢的各項參數恢復情況又有所不同。如在平均壓力和爪印寬度中,前肢的恢復情況較后肢好;大接觸面積、爪印面積、爪印長度則四肢都有較明顯的恢復,說明大鼠在治療后,四肢的力量有所增加,導致其爪子的壓力、接觸面積增大。

此外,VisuGait小動物步態分析系統可以捕捉到各組動物在接觸時間、提爪時間、步速參數中的數據,且可以通過這些數據來表明,干細胞移植治療后的大鼠四肢恢復明顯接近正常水平,步行過程中停留的時間明顯減少,提示其在運動過程中身體的穩定、平衡性有明顯的恢復,同時步行的速度也加快。

其次,VisuGait小動物步態分析系統通過測量步態模式、正常步態指數、 步幅及兩前爪/后爪間距離等參數來反應大鼠運動的協調性,屬于精確的定量性分析。其中步態模式和正常步態指數這兩個參數能較好地反應出大鼠的運動協調性,曾較早用于脊髓損傷和帕金森病導致的肢體協調性下降評估。腦損傷后的大鼠,在行走過程中的步伐順序發生了明顯變化,且各種平常較少見模式的出現比例也增多;而在干細胞移植治療組,這種趨勢相對于損傷組則有所減少。正常步態指數-正常步態數量占總步態數量的百分比,在治療后也呈顯著提高。大鼠腦損傷后步幅明顯下降,提示TBI后總體協調性下降、導致步行速度減慢;而UC-MSCs移植治療后使其步行速度明顯提高。行走支撐模式參數結果表明,大鼠在TBI后,其行走過程靠四肢爪子同時支撐平衡身體的比例明顯增高,分析可能與大鼠在腦損傷后整個身體不平 衡有關。(正常情況下的大鼠用三只爪子就可很好地平衡身體)。

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